Test laboratória pre výskum pohlavných chorôb (VDRL) je krvný test používaný na skríning syfilisu, pohlavne prenosnej infekcie spôsobenej baktériou Treponema pallidum. Test VDRL je skríningový nástroj používaný na detekciu syfilisu. Na potvrdenie diagnózy je často potrebné ďalšie testovanie (napr. 3. 4.). Test skrínuje syfilis detekciou protilátok v krvi. Poskytovateľ zdravotnej starostlivosti odoberie malú vzorku krvi, ktorá sa analyzuje v laboratóriu. Nie, hladovka sa nevyžaduje. Áno, niektoré stavy, ako sú autoimunitné ochorenia, tehotenstvo alebo nedávne očkovanie, môžu spôsobiť falošne pozitívne výsledky. Výsledky sú zvyčajne dostupné do 1-2 dní. Reaktívny výsledok naznačuje možnú infekciu syfilisom.
Princip a interpretácia netreponemových testov
Treponema pallidum nie je kultivovateľná na bežných kultivačných pôdach; preto je dôležitá priama vizuálna alebo in vitro detekcia protilátok v sére. Netreponemové (nešpecifické) reagínové testy detegujú plazmatické reagíny vo sére a likvore, pričom ich titre korelujú s aktivitou ochorenia. Medzi najznámejšie patrí VDRL, RPR a RRR. Tieto testy nie sú špecifické pre syfilis a môžu byť ovplyvnené inými stavmi, napríklad autoimunitnými ochoreniami, graviditou alebo očkovaním, čo môže viesť k falošne pozitívnym výsledkom. Pri pozitívnom netreponémovom teste sa k potvrdeniu vykonávajú treponémové testy.
Treponémové testy a diagnostický postup
Treponémové testy sú špecifické a detekujú protilátky IgM a IgG proti Treponema pallidum. Často sa používajú TPPA, TPHA, EIA, CMIA a rôzne imunoblotové testy. U novorodencov a v gravidite sa často vykonávajú špecifické testy na potvrdenie infekcie alebo prítomnosti materských protilátok. Význam stanovenia titrov špecifických protilátok je najmä v diagnostike kongenitálneho syfilisu a neurosyfilisu. V praxi sa kombinujú netreponémové a treponémové testy, pričom pozitívny výsledok jedného z nich vyžaduje konfirmáciu inými testami. CMIA IgM + IgG sa používa na skríning a je plne automatizovaný; negatívny výsledok na doručenie vzorky do laboratória znamená vylúčenie aktívnej infekcie u daného vyšetrenia.
Pri prvej infekcii sa môžu objaviť sérologické testy v skoršom štádiu s variabilnou citlivosťou. Testy TPPA, TPHA, FTA-abs a iné treponémové testy zostávajú pozitívne u väčšiny pacientov aj po vyliečení. Falošne pozitívne výsledky sa môžu vyskytovať pri autoimunitných ochoreniach, tehotenstve a borelióze; preto je rozhodujúca konfirmácia imunoblotom alebo inými špecifickými testami. V praxi sa preferuje imunoblot s detekciou IgM a IgG proti jednotlivým membránovým proteínom T. pallidum.
Laboratórna logistika a odber vzoriek
Odber krvi sa vykonáva v množstve 5-7 ml do špeciálnych odberových súprav s transportom krvi. Do dvoch hodín môže krv putovať pri izbovej teplote. Plodová voda, očná tekutina a likvor je vhodné zasielať v množstve min. 1 ml. V rámci skríningu a diagnostiky sa často odoberajú vzorky na potvrdenie v Národnom referenčnom centre pre syfilis. V praxi sa kombinujú testy RRR a TPPA a všetky nové nálezy sa konfirmujú imunoblotom IgM a IgG. Všetky reaktívne sérum v CMIA sa overujú testami RRR a TPPA.
Praktické aplikácie a skríning počas tehotenstva
Test VDRL je často bezpečný a odporúčaný počas tehotenstva ako prevencia vrodeného syfilisu. U gravidných žien je dôležitá pravidelná skríningová diagnostika; väčšinu poistných plánov pokrýva test VDRL, ak je objednaný z medicínsky nevyhnutných dôvodov. Včasný skríning a liečba zabraňujú kongenitálnemu syfilisu a znižujú riziko infekcie plodu. Dôraz sa kladie na to, že aj pri úspešnej liečbe neposkytuje imunitu a ďalšie testovanie je potrebné v priebehu sledovania liečby.
tagvideo>Video: Prehľad rýchlej reaginovej reakcie a klinické použitiePodstatné fakty a klinické súvislosti
- Syfilis je spôsobená Treponema pallidum subs. pallidum, je to invazívná spirochéta s postupnou manifestáciou štádií: primárne, sekundárne, latentné a terciárne.
- Primárne štádium zahŕňa tvrdý vred (chancre), ktorý sa objavuje po 10-90 dňoch infekcie a môže prejsť spontánne do sekundárneho štádia bez liečby.
- Sekundárne štádium sa prejavuje širokou frekvenciou kožných a sliznicových lézií, lymfadenopatiou a systémovými príznakmi. Môžu sa objaviť condylomata lata a alopécia.
- Neskoré štádiá zahŕňajú neurosyfilis, kardiovaskulárne syfilis a gumatózny syfilis; kongenitálny syfilis môže postihnúť novorodencov pri prenose cez placentu alebo pôrodný kanál.
- Laboratórna diagnostika zahŕňa kombináciu netreponémových a treponémových testov; netreponémové testy umožňujú skorú detekciu, treponémové potvrdzujú infekciu a sledujú imunitnú odpoveď.
- Pri liečbe je kľúčová stabilita hladiny penicilínu počas celej liečby; alergie na penicilín sa riešia alternatívami ako tetracyklíny, avšak rezistencia na makrolidy zvyšuje problém.
Tabuľka 1: Počet vyšetrení špecifických protilátok a pozitívnych vzoriek (2008-2016)
| Rok | Počet vyšetrení | Pozitívne vzorky |
|---|---|---|
| 2008 | ... | ... |
| 2009 | ... | ... |
| 2010 | ... | ... |
| 2011 | ... | ... |
| 2016 | ... | ... |
V prípade pozitívnych nálezov sa všetky novodiagnostikované prípady posielajú na konfirmačné vyšetrenie do príslušného referenčného centra. V rámci dermatovenerológie je štandardom overenie reaktívnych vzoriek kombináciou CMIA IgM + IgG s následnou konfirmáciou RRR a TPPA a imunoblotom IgM a IgG. Kongenitálny syfilis sa pri vyšetreniach potvrdzuje alebo vylučuje podľa plodu a materinského stavu.
Rôzne prístupy a moderné poznámky
PCR a molekulárne metódy sa používajú najmä na analýzu sterilných tekutín (mozgomiechový mok, amniotická tekutina, očná krv). Akedená diagnostika treponémov býva náročná kvôli nízkej observácie v tkanivových vzorkách a potrebe špeciálnych techník vizualizácie a histopatológie. Bioinformatika a dizajn primerov sú dnes dôležitou súčasťou laboratórnej diagnostiky aj výskumu syfilisu.
Príkladom sú postupy, ktoré zefektívňujú skríning a presnosť diagnostiky: hot-start PCR, touchdown PCR, nested PCR a multiplex PCR; tieto techniky zvyšujú špecificitu a citlivosť a umožňujú detekciu viacerých cieľov súčasne. Real-time PCR a RT-qPCR sú kľúčové pre kvantifikáciu a detekciu RNA vírusov, ako aj pri forenzných aplikáciách a genetickom testovaní.